基因传递的背景知识现代分子生物学的发展基于一个原则,核酸可以被导入到细胞中去。无论是报告基因分析还是RNA干扰实验,抑或是基因敲除小鼠还是基因治疗,所有这些实验都基于一个前提,人们可以将无论是天然分离还是经过人工重组改造的DNA或RNA分子有效地传递到细胞中去并使之发挥功能。高效地将基因或者其它形式的核酸传递到目的细胞中去,不仅使得在细胞内或者动物体内研究基因的功能变得可能,而且还导致了新的疾病治疗方式——基因治疗。然而,人们面临的一个重大的挑战在于,由于细胞膜的存在,细胞并不容易接受外来的物质。 基因传递载体的性质决定了基因传递的效率,有效的基因传递载体或者方法,必须具备以下几个要素: 1,既可以高效传递基因到分裂细胞,也可以高效传递到非分裂细胞 2,无论是在动物体内还是细胞内,达到高传递效率 3,可以依据实验需要控制在细胞内的表达量高低 4,最好能够长期,稳定的表达(通过改造载体,也可以做到可诱导表达) 5,细胞毒性小或者没有 6,体内不引起细胞或者机体的免疫反应 依据这些要求,科学家们开发出了各种基因传递方法,主要可以分为非病毒载体介导的基因转染(transfection)和病毒载体介导的基因传导(transduction)。前者主要通过使用化学转染试剂或者电转将质粒传递到细胞中去。后者主要是 一个病毒介导的过程。研究人员通过了解病毒的生活周期和病毒基因的功能并利用病毒可以在体内和体外高效,广谱地侵染细胞的特点,对病毒基因组进行改造,通过去除病毒复制和致病性元件增加安全性,并保留部分元件从而继续赋予重组病毒载体高效广谱侵染细胞的能力。 无论采用哪种方法传递传递基因,其底限在于:必须将遗传物质高效地导入到靶细胞中去,关键就在于如何做到这一点。到目前为止,没有一种特定的转染方法,化学试剂或者病毒载体可以将基因传递到所有细胞中去,相对来说,病毒载体介导的基因传递无论从广谱性,效率和其它特性而言,都是更好的一种基因传递方式。同时,通过积累不同基因传递方法的可转染/传导细胞数据库,可以帮助研究人员更好地依据具体的实验系统和目的选择基因传递方法。 银河娱乐澳门娱乐网站提供最多样化的病毒载体和庞大的病毒侵染数据库,帮助研究人员选择合适其所用细胞的病毒载体。 银河娱乐澳门娱乐网站的技术支持团队还能依据研究人员的实验帮助设计和提供最优的病毒载体动物体内或者体外使用方法。 |