心血管与代谢邻域疾病研究平台

cardiovascular

代谢疾病和心血管疾病研究团队拥有经验丰富的管理人员和研究团队，截至目前，银河娱乐澳门娱乐网站代谢疾病和心血管疾病研究团队已进行超过500个化合物的体外筛选评价，体内药效评估超过100个项目。团队以客户需求为导向，与多个国内外制药公司，大中小型生物技术企业及大学科研部门广泛合作，为客户提供优质而全面的药效评价及机制研究服务。

服务范围

体外研发服务

• 体外代谢靶标药物筛选

• 体外MOA（Mode Of Action）研究

体内药理药效评价服务

• 糖尿病模型

• 心血管疾病模型

• 肥胖模型

• 肝脏疾病模型

• 肾病模型

体外代谢靶标药物筛选    

体外MOA（Mode Of Action）研究

• GLP-1受体/报告基因稳转株细胞：GLP-1 类似物筛选

• 肾系膜细胞及上皮细胞：相关肾病、糖尿病药物筛选

• 胰岛：胰岛素的合成和分泌

• 脂肪细胞：葡萄糖的摄取

• 肝脏细胞：糖原合成，糖异生，脂质代谢，肝损伤、肝纤维化以及溶纤维化的标志物分析

• 肌肉细胞：葡萄糖的摄取，脂肪酸的氧化

大鼠原代胰岛细胞胰岛素分泌实验

3T3-L1细胞葡萄糖摄取实验

体内药理药效评价服务---糖尿病/肥胖

糖尿病是一种全球流行的慢性进展且不可治愈的疾病，90%的糖尿病患者为II型糖尿病。当前的降糖治疗有显著的副作用，因此急需风险更低的新治疗药物并控制糖尿病并发症。同时，急需能够加强新药用于患者之前的临床前评价的合适的技术和模型。

糖尿病/肥胖模型

DIO models

DIO+STZ induced T2DM models

BKS-DB自发性糖尿病小鼠

ZDF自发性糖尿病大鼠

B6-OB自发性肥胖/糖尿病小鼠

检测项目

摄食量，血糖，GTT，ITT，心超，体脂比，骨密度，代谢笼，血生化，胰岛素检测，糖化血红蛋白，代谢相关的细胞因子，炎症因子，组织病理学

糖尿病/肥胖模型鼠特征对比

体内药理药效评价服务---DIO小鼠

银河娱乐澳门娱乐网站心血管与代谢疾病部门利用C57BL/6JNju小鼠从5周开始喂养自制高脂饲料（XZ-HF-60)或者60%高脂饲料（D12492）进行造模，此品系可以用研究糖尿病、炎症、代谢类疾病等。目前我们可以提供6-29周龄的DIO小鼠。

DIO 小鼠模型特点

• 可以用7-30周的DIO雄鼠研究饮食诱导性肥胖

• 可用于体内药理学研究

• 可用于表型和母性研究

  
  

体重/体脂监测

GTT/ITT分析

体内药理药效评价服务---DIO+STZ诱导的T2DM模型

C57BL/6 模型造模方法：

6周龄，60% HF 饲料饲养4周，禁食过夜后腹腔注射STZ（25mg/kg）3次，每次间隔1天

SD Rat 模型造模方法：

6周龄，60% HF 饲料饲养2个月，禁食过夜后腹腔注射STZ（45mg/kg）1次

体内药理药效评价服务--- 自发糖尿病小鼠/大鼠

BKS-DB

模型描述：

BKS-DB模型以Dock7^m小鼠为背景，利用CRISPR/Cas9技术和囊胚注射技术构建Dock7^m-Lepr双基因突变小鼠。该品系纯合子血糖监测发现，血糖水平与野生对照相比呈显著性差异，可用于II型糖尿病研究。

模型数据：

B6-OB

模型描述：

B6-OB模型是利用针对mouse Leptin基因的gRNA, 采用CRISPR/Cas9技术和囊胚注射技术，得到能够导致Leptin基因移码突变的小鼠模型。纯合子小鼠大约4周开始出现肥胖表型，可达野生型小鼠体重的3倍，可用于肥胖症研究。纯合子小鼠血糖在12周以前略高于对照组，之后恢复正常，是早期高血糖模型。

模型数据：

体内药理药效评价服务---心血管疾病

心血管疾病模型

• 自发高血压小鼠模型

• 自发性动脉粥样硬化小鼠模型

• 冠状动脉结扎致心肌缺血大鼠模型

检测项目

血压，血清TC，TG，HDL-c，LDL-c，血管组织病变，Cholesterol Efflux Assay，炎症因子，心率，心超，心脏组织病变

B6.129P2-Nos3^tm1Unc/J自发高血压小鼠模型

模型描述：

B6.129P2-Nos3^tm1Unc/J模型以C57BL/6J小鼠为背景，利用传统ES打靶技术构建Nos 3基因突变小鼠。该品系纯合子血压监测发现，血压水平较野生对照高约20 mmHg，同时也表现出心率下降。

模型数据：

B6/JNju-Apoe^em1Cd82/Nju动脉粥样硬化小鼠模型

模型描述：

该模型是以C57BL/6J小鼠为背景的ApoE基因敲除鼠，采用CRISPR/Cas9方法制作，Exon 3上切割产生的断口经NHEJ修复后，引入的in-del突变导致基因失活。ApoE敲除小鼠喂食40%高脂饲料后，能加快动脉粥样硬化的进程。

模型数据：

小鼠主动脉弓油红O染色实验结果

B6/JNju-Ldlr^em1Cd82/Nju动脉粥样硬化小鼠模型

模型描述：

该模型是利用针对mouse LdlR基因的gRNA, 采用CRISPR/Cas9技术和囊胚注射技术，得到能够导致LdlR基因移码突变的小鼠模型。LdlR基因缺陷小鼠可用来研究糖尿病肾病，动脉粥样硬化高脂血症和高血糖疾病等。

模型数据：

冠状动脉结扎致心肌缺血大鼠模型

动物：6周龄SD大鼠（180-220g）

造模方法：大鼠用戊巴比妥钠腹腔注射麻醉，记录Ⅱ导联心电图，呼吸机辅助呼吸(呼吸频率60次／min，潮气量10～12ml，呼吸比为2：1，以保持动脉血PaCO2、PaO2和pH维持在正常范围)。在胸左侧第3、4肋间处打开胸腔，暴露心脏，用细小弯针在冠状动脉左前降支下穿一丝线结扎，以缝线下方心肌色泽变浅、苍白，同时心电图出现ST段弓背向上明显抬高，为结扎成功。

指标观察：造模后24小时，将各组大鼠麻醉取血，分离血清，用自动生化分析仪和化学发光分析机分别测定各组大鼠血中CK-MB、eTNI含量。

结果判定：模型组大鼠血中CK-MB、eTNI含量显著高于假手术组。

内药理药效评价服务---肾病

慢性肾病发病率急剧上升，由于肾病的病因既包括代谢的紊乱也包括免疫系统的下降，另外还受到遗传等因素的影响。因此肾病药物与治疗措施的研发亟需开发多种不同类型的，贴近实际临床病理特征的肾病动物模型。银河娱乐澳门娱乐网站针对肾病药物研发建立了多种肾病模型，为肾病的新药临床前研究提供专业服务。

肾病模型

• 肾纤维化模型

• 单侧肾切除糖尿病模型

• 嘌呤霉素诱导的肾病模型

• 血管紧张素II渗透泵和单侧肾切除诱导的急性肾损伤模型

检测项目

尿量，尿糖，尿蛋白，肾小球滤过率

炎症因子：TGF-β1，IL6 等

肾功能指标：CRE, BUN, UA, Kim-1, renin

肾组织病理检测

肾间质纤维化小鼠模型

模型描述：

利用单侧输尿管梗阻技术，将C57BL/6J小鼠左侧输尿管结扎，结扎后1周内左侧肾脏开始出现肾间质纤维化病理特征，并伴随大量细胞和分子病理生理变化。

模型数据：

体内药理药效评价服务---肾病

模型描述：

利用C57BL/6J小鼠行左侧肾脏切除术，术后正常饲养，护理恢复。1周后给予60%高脂饲料饲养8周，构建单侧肾切除糖尿病小鼠模型。该模型的肾脏病变特征近似糖尿病性肾病，可用于转化医学研究或新药临床前药效评估。

模型数据：

嘌呤霉素诱导的肾病模型(PAN)

模型描述：

利用wistar大鼠行静脉注射嘌呤霉素一次，剂量40mg/kg，构建嘌呤霉素诱导的肾病模型(PAN)。

模型数据：

体内药理药效评价服务---肝病

急性和慢性的肝脏类疾病研究威胁人类的健康，肝脏疾病是药物开发的重点方向。银河娱乐澳门娱乐网站肝病研究团队建立了多种动物及各个种类的肝脏疾病模型，其中包括急性肝损伤模型，肥胖诱发的肝损伤模型，非酒精性脂肪性肝炎（NASH），酒精性脂肪肝（ASH），肝纤维化模型，能够为客户提供高效的先导化合物肝脏疾病疗效筛选验证。

肝病模型

• 高脂诱导的慢性脂肪肝模型

• CCl4诱导的急性肝损伤模型

• 酒精诱导的急性肝损伤

• 胆管结扎引起的肝纤维化模型

• DIO+CCl4诱导的小鼠NASH模型

检测项目

常规：体重，行为，摄食，摄水及排泄

肝脏重量，腹水检查，门静脉测压

生化：血清ALT/AST分析，基因表达及分析，

肝细胞羟脯氨酸检测

病理：肝脏组织H&E染色，IHC，Oil red和Masson Trchrome染色

高脂诱导的慢性脂肪肝模型

模型描述：

利用C57BL/6J小鼠从4周龄开始喂养自制高脂饲料（XZ-HF-60)或者60%高脂饲料（D12492）进行造模，20周龄后模型鼠平均体重＞45g，出现明显的脂肪肝病理改变。

模型数据：

体内药理药效评价服务---肝病

CCl4诱导的急性肝损伤模型

模型描述：

选用6周龄SD大鼠，用四氯化碳（CCl4）诱导法。大鼠按3ml/kg体重腹腔注射50%的四氯化碳橄榄油溶液，24小时后取血检测。

模型数据：

单管结扎引起的肝纤维化模型

模型描述：

选用6周龄SD大鼠，按10mg/kg体重腹腔注射3％戊巴比妥钠麻醉，腹部皮肤消毒，无菌操作沿腹部正中线剪开腹腔，分离出胆管，在胆管近端和远端2处结扎胆管。手术后正常饲养28天。28天后解剖取肝脏进行组织病理学检查。

模型数据：

肝脏组织H&E染色

DIO+CCl4诱导的小鼠NASH模型

模型描述：

选用C57小鼠，给予60%高脂饲料饲养8周。从高脂饲养第5周开始，每周腹腔注射40% CCl4一次，剂量4ml/kg/次， CCl4 诱导共4周，诱导结束后眼眶采血评估血清生化指标判断造模成功。

模型数据：