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免疫沉淀 chip 实验原理 染色质免疫共沉淀技术(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP)是一种适用于研究蛋白质与生物体细胞中DNA相互作用的经典方法,这项技术帮助研究者判断在细胞核中基因组的某一特定位置会出现何种组蛋白修饰。将ChIP与第二代测序技术相结合的ChIP-Seq技术,能够高效地在全基因组范围内检测与组蛋白、转录因子等互作的DNA区段,研究体内转录因子和靶基因启动子区域直接相互作用的方法,对于调控蛋白在基因组上的结合靶点筛选、差异化表观遗传变异的原理揭示提供了重要的解决思路。 技术原理 在活细胞状态下固定蛋白质-DNA复合物,并将其随机切断为一定长度范围内的染色质小片段,然后通过免疫学方法沉淀此复合体,特异性地富集目的蛋白结合的DNA片段,通过对目的片断的纯化与检测,从而获得蛋白质与DNA相互作用的信息。
适用研究
提供结果 ChIP-DNA:分布在100~500bp范围,且主要片段在~250bp; 总量≥5ng; Input率; 阴性对照抗体对目的片段的富集程度小于检测抗体2倍以上。 样品要求 目的基因或转录因子的相关背景资料; 动物:细胞系、低脂肪含量组织液氮速冻样本(细胞数大于5×106个); 抗体:进口IP级别抗体/非商业化标准抗体(需检测) 样品运输:干冰运输,建议用灭菌的样品袋或LoBind 管,parafilm将管口密封好。 服务周期 8周 参考文献 environment of cycling and mitotic cells.PNAS110: E3388-E3397(2013). |