|
磁珠分选细胞 Sorting cell 实验原理 免疫磁珠法分离细胞是基于细胞表面抗原能与连接有磁珠的特异性单抗相结合,在外加磁场中,通过抗体与磁珠相连的细胞被吸附而滞留在磁场中,无该种表面抗原的细胞由于不能与连接着磁珠的特异性单抗结合而没有磁性,不在磁场中停留,从而使细胞得以分离。 免疫磁珠法分为正选法和负选法: 正选法-磁珠结合的细胞就是所要分离获得的细胞 负选法-磁珠结合不需要的细胞,游离于上清液的细胞为所需细胞 一般而言,负选法比正选法的磁珠用量大 磁珠: 大小在0.1-0.45mm 包被了生产的高质量单抗磁珠已为白细胞亚群的分选所优化 将包被了特异性单抗的BD IMag磁珠加入细胞悬液,磁珠特异性地与有相应抗原的细胞亚群结合,通过分离得到的连有磁珠的细胞可直接用于功能试验和用流式细胞仪检测。 磁分离细胞的重要指标是: 纯度和得率,这取决于磁珠所连接单抗的特异性和磁珠大小(磁性),然而太小的磁珠得率不高,太大的磁珠又会影响细胞活性,也无法直接上流式。 MACS技术优点 1、稳定、高质量的分选 使用MACS技术,可获得高纯度(90-99%)、高回收率的分选细胞群。 2、对细胞无损伤 50nm微珠和MACS分选柱均无毒性,对细胞无损伤,可以纯化有活力和功能活性的细胞而不影响其活性。 3、操作简便、快速 MACS技术操作简单,消毒方便。磁珠孵育时间很短,仅需15分钟。手动分选可在30分钟内完成,autoMACS分选可在2.5-10分钟之内完成。 4、从实验室到临床 MACS技术可以实现从105到1011个细胞分选。如果使用频率高,可选用autoMACS;密闭系统内无菌分选细胞,可选用CliniMACS。 5、分选后细胞适用于后续实验 流式细胞术、显微镜分析和分子生物学研究显示MACS分选对细胞没有任何影响。分选后细胞适用于细胞培养和体内实验。此外,分选得到的标记和未标记细胞组分均可回收利用。 6、从细胞到分子分选 MACS技术不仅可以分选各种细胞,还可以分选转染细胞、亚细胞物质、蛋白质、DNA、RNA及mRNA。 服务流程
实验结果展示 |